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技術文章

紫外分析儀可用于核酸蛋白檢測儀中
紫外-可見光分光光度計在生物科技中可用于測定核酸和蛋白質的濃度。首先，核酸的基本結構單位是核苷酸。核苷酸由一個含氮堿基(嘌呤或嘧啶)，一個戊糖(核糖或脫氧核糖)和一個或幾個磷酸組成。由于核酸的堿基具有共軛雙鍵，因而有紫外吸收的性質。各種堿基、核苷和核苷酸的吸收光譜略有區別。核酸的紫外吸收峰在260nm附近，可用于測定核酸。根據260nm與280nm的吸收光度(A260)可判斷核酸純度。

再談蛋白質，構成它的組成是氨基酸，其中的種類包含酪氨酸、苯丙氨酸和色氨酸，這幾種芳香族氨基酸的苯環含有共軛雙鍵，使蛋白質具有吸收紫外光的性質。吸收高峰在280nm處，其吸光度(即光密度值)與蛋白質含量成正比。所以，紫外吸收法是280nm的光吸收法，含有核酸的蛋白質溶液使用280和260nm的吸收差法較好。蛋白質的稀溶液采用215與225nm的吸收差法。此外，蛋白質溶液在238nm的光吸收值與肽鍵含量成正比。利用一定波長下，蛋白質溶液的光吸收值與蛋白質濃度的正比關系，可以進行蛋白質含量的測定。紫外吸收法簡便、靈敏、快速，不消耗樣品，測定后仍能回收使用。

還有一些測定蛋白質的方法，是通過蛋白質與一些物質的作用產生顏色，然后在此有色光光譜內測定吸光度。將已知濃度的蛋白質溶液稀釋幾個倍數，與物質作用后作為標準品，測定吸光度做出一條曲線，然后未知溶液的濃度就可通過吸光度來得出。這些方法包括，凱氏定氮法，考馬斯亮藍法(Bradford)，Folin-酚試劑法(Lowry法)和BCA法。
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